PDF (8.4 MB)

Thesis
T細胞特異的 c-Maf トランスジェニックマウスにおけるB細胞増多メカニズムの解析

高松　真裕子
臨床医学研究系　内科学

医学博士　甲第1250号　平成26年3月28日 （埼玉医科大学）

【目的】
　これまでの解析から，T細胞特異的 c-Maf トランスジェニック（Tg）マウスの脾臓では野生型（WT）マウスに比べB細胞の比率が著増していることが判明している．今回このメカニズムを解析した．

【方法】
　c-Maf TgマウスでB細胞が増多するメカニズムとして以下の仮説が考えられる．仮説�@ 使用したマウスはT細胞特異的（CD2プロモーターの支配下）に c-Maf が強制発現するマウスであるが，B細胞にも c-Maf がある程度発現しており，B細胞が c-Maf の影響を受けて増加する（能動的増加）．仮説�A c-Maf Tg マウスのT細胞が，例えば濾胞性ヘルパーT（Tfh）のような細胞として機能し，B細胞分化を誘導し，その結果としてB細胞が増加する（T細胞による指令）．仮説�B c-Maf TgマウスでT細胞が減っていることにより，そのスペースを埋めるためにB細胞が増加する（受動的増加）．これら3つの機序は互いに対立するものではなく，複数の機序が共存している可能性もある．これらの内でどの機序が関与しているかを明らかにするため，骨髄キメラマウスを利用した競合実験（competition assay）を行った．また c-Maf は Tfh 細胞の分化に重要であることが報告されているため，ヒツジ赤血球を腹腔内投与したマウスを用いてフローサイトメトリー（FCM）および免疫組織染色を行い Tfh 細胞や活性化B細胞を解析した．

【結果および考察】
　competition assayにより能動的増加の可能性は否定的であった．興味深いことに，c-Maf Tg 由来のT細胞はWTのT細胞存在下では末梢に存在できず，胸腺の分化段階で消失していることが示された．FCMでは Tfh マーカーを持っている細胞の比率が c-Maf Tgマウスで有意に増加していたが，活性化B細胞の比率は増加していなかった．このことから，T細胞による指令は否定的であった．competition assayでみられた c-Maf TgマウスでのT細胞分化障害について胸腺細胞の解析を行い，DN4分画において TCRβ鎖発現の低下を認めた．このことから c-Maf TgのT細胞分化障害はβセレクションの障害である可能性が考えられた．

【結論】
　T細胞特異的 c-Maf TgマウスのB細胞増多のメカニズムは胸腺におけるT細胞の分化が障害され，末梢のT細胞が減少していることに基づく受動的増加と考えられた．